0 前言脂质体是 2 0世纪 60年代英国学者Ｂａｎｇｈａｍ等将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现并命名的 .磷脂分散在水中自然形成多层囊泡 ,每一层均为脂质双分子层 .囊泡中央和各层之间被水相隔开 ,双分子层厚度约为 4ｎｍ ,这种具有类似于生物膜结构的小囊称为脂质体 ,由于它的结构类似生物膜 ,又称为人工生物膜<1 > .最初脂质体主要作为人工生物膜用于研究生物膜的结构和功能的关系 ,1 972年 ,Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ和Ｒｙｍａｎ将脂质体用于药物载体<2 > .1 脂质体的结构形态及分类脂质体是磷脂或其它两亲性物质分散于水中形成的一层或多层同心脂质双分子膜包封而成的球状体 .在水中平衡后有两亲性质 (亲水性和亲脂性 ) ,直径大小约为几十个纳米到几十个微米 .在脂质体的水相和膜内可以包裹多种物质 ,其化学成分主要是类脂和蛋白质 ,不同分子扩散和离子穿膜的速率有很大不同 .按大小及双层数目 ,脂质体可分为大单层脂质体 (ＬＵＶ)、小单层脂质体(ＳＵＶ)、多层脂质体 (ＭＬＶ) ;按其特征分为 :一般脂质体、隐性脂质体、靶向脂质体、热敏脂质体、ｐＨ敏感脂质体、光敏脂质体、磁性脂质体、重组脂质体 ;按电荷性质可分为 :正电性脂质体、负电性脂质体和中性脂质体<3> .它们的分类及性能参数见表 1 <4> .2 脂质体作为药物载体2 .1 脂质体作为药物载体的作用机理目前临床上的大部分药物在体内到达作用部位之前 ,己被部分降解或排除 ,使药物的效价降低 ;另外药物进入到身体后不但作用于靶组织 ,而且还作用于非靶组织 ,引起毒性作用 .在 1 972年Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ和Ｒｙｍａｎ根据脂质体的主要原料是磷脂及其衍生物 ,而磷脂是细胞的固有组分 ,没有免疫原性 ,是生物相容物质等特点 ,提出可以用脂质体作为药物载体的可能性 .在研究中发现药物经脂质体包封后 ,药代动力学出现了很大的变化 ,药物在体内的分布发生了变化 ,药物在血循环中的半衰期大大延长 ,药物的毒副作用得到了明显的改善 ,而且可以改变药物的溶解性质等<2 ,3> .脂质体作为一种药物载体 ,水溶性的药物可包封于脂质体的亲水部分 ,而脂溶性或两性的药物则直接与脂质体亲脂部分或脂质双分子层相结合 .脂质体是一种新的药物载体 ,对机体无毒 ,其脂质双分子层与生物膜有较大的相似性和组织相容性 ,可通过各种途径进入血液循环 ,而进入血液循环的脂质体主要被富有吞噬细胞的网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能 ,故利用脂质体作为药物载体不仅可以增加药物的溶解性 ,提高药物表 1 脂质体的分类及性能参数脂质体的种类大小 /ｎｍ优点缺点制备方法多层脂质体难以包封的物质有效地40 0 -35 0 0包封的体积大 ,包封性好送入细胞中 ,难包封聚好 ,相对稳定性好合物 ,包封容量相对低 ,薄膜法形状大小不均匀包封有效体积小 ,难包封聚合物 ,脂质体易出现互超声波法、乙醇注入法、小单层脂质体 2 0 -5 0形状大小均匀溶现象 ,不同脂质在膜内法兰西加压法、高压乳化外分布不均匀法包封能力好 ,包封体积大 ,逆相蒸发法、乙醚注入法、大单层脂质体 2 0 0 -10 0 0能包封聚合物 ,对水溶液大小不均匀膜挤压法、洗涤剂除去法、药物的包封率高钙离子熔化法的生物利用度 ,而且可使药物制剂具有高度的靶向性 ,从而提高了药物的治疗效果 ,减少药物的治疗剂量<5> .脂质体作为药物载体最突出的特征是靶向性 ,靶向性<5> 是指利用药物载体的释放系统改变药物的动力学 ,使药物只作用于病变部位的靶组织 ,而避免作用于正常细胞 .如果在脂质体表面联上不同配体 ,如植物凝血素、肽类激素等 ,可使其靶位与受体细胞产生专一性结合 ,并介导释药 .利用某些物理化学因素也可提高靶向性 ,如温度敏感性脂质体和ｐＨ敏感脂质体 .2 .2 脂质体作为药物载体的应用2 .2 .1抗肿瘤药物的载体抗肿瘤药物由于其严重副作用 ,限制了它们在临床上的应用 .脂质体作为药物载体激活巨噬细胞治疗肿瘤是一种有前途的方法 ,激活的巨噬细胞能区别致肿瘤细胞和非致肿瘤细胞 ,它们能破坏肿瘤细胞 (包括对其它宿主反应机制和抗瘤药物耐受的肿瘤细胞 ) .美国ＦＤＡ批准了阿霉素脂质体ＴＬＣＤ99、庆大霉素脂质体己进入临床试验 .阿霉素 (ＡＤＭ)是有效的抗肿瘤药物之一 ,它对心脏具有严重毒副作用 ,Ｅｒｉｃ等研究表明脂质体包裹阿霉素比游离药物的毒性要降低 5 0 %～70 % <6> .2 .2 .2 抗感染性药物的载体脂质体作为治疗网状内皮系统疾病的药物载体是脂质体最成功的应用之一 .由于巨噬细胞为脂质体药物的主要靶细胞 ,所以富含吞噬细胞的肝脏、脾等是脂质体的重要靶器官 .而肝脏又为许多寄生虫提供了繁殖场所 ,因此利用脂质体作为药物载体治疗寄生虫病可以将药物靶向到肝内寄生虫从而达到降低药物的毒副作用 ,提高药物疗效的目的<5> .另外 ,体内外实验也证明两性霉素Ｂ脂质体对白色念珠菌、隐球菌或组织细胞浆菌引起的感染治疗效果均优于游离药物 ,且毒性大大降低<5> .2 .2 3 抗结核药物的载体结核病菌主要寄生于正常细胞内 ,有一定的耐药性 ,使用一般的抗结核药常常需要较长的治疗时间<6> .Ｖｌａｄｉｍｉｒｓｋｙ<7> 等用携载链霉素的脂质体处理结核杆菌感染的小鼠 ,发现用链霉素脂质体处理的小鼠较游离链霉素处理的小鼠存活时间长 .2 .2 .4 激素类药物的载体抗炎甾醇类激素包入脂质体后 ,可以浓集于炎症部位便于被吞噬细跑吞噬 ,同时也避免了游离药物与血浆蛋白作用 .药物一旦达到炎症部位 ,都可以内吞 ,在融合后释药 ,在较低剂量下便能发挥疗效 ,从而减少甾醇类激素因剂量过高而引起的并发病和副作用<6> .2 .2 .5 多肽及酶类药物的载体多肽及酶类药物都是生物大分子 ,其共同特点是在生物体内不稳定 ,易被蛋白水解酶降解 .该类药物在生物体内的半衰期较短 ,而且绝大部分不利于口服给药 ,当用脂质体包裹后 ,在生物体内的半衰期明显提高 ,而且脂质体能增加细胞对超氧化物歧化酶 (ＳＯＤ)的摄取能力 ,从而能更好地保护细跑免受自由基损伤 .如缺乏α -糖苷酶的Ｐｏｍｐｅ’ｓ疾病和缺乏 β -糖苷酶的Ｃａｎｃｈｅｒ’ｓ疾病 ,注射游离形式的酶易在循环中被降解 ,而被包裹后 ,脂质体被细胞内吞从而将药物直接释放到溶酶体 ,这样可以保护酶在循环中免遭降解<8> .2 .2 .6 解毒剂的载体重金属如铅、钚等过量进入体内能引起中毒 ,肝脏是铅和钚沉积过量产生毒性的部位 .使用螯合剂如ＥＤＴＡ或ＤＴＰＡ可以螯合溶解金属 ,治疗金属贮积病 .这些螯合剂不能透过细胞膜从而影响了它们的体内螯合效果 ,将螯合剂制成脂质体剂型后 ,脂质体可以作为将螯合剂转运到贮积金属的细胞中的载体 ,例如将ＤＴＰＡ包封在脂质体内 ,使其穿透细胞膜 ,即可有效地从肝中除去钚 ,从肾中除去汞和促进胶体金从粪便中排出 ,以达到解毒目的<9> .2 2 .7 心血管药物的载体近年来脂质体作为药物载体导向治疗心血管疾病的研究越来越受到重视 .心肌细胞可以通过膜融合、内吞、吸附和膜磷脂交换等多种方式与脂质体相互作用 ,药物被脂质体包裹后 ,缺血缺氧的心肌或心肌细胞对药物的摄入显著增加 .用心肌细胞抗体制备的免疫脂质体 ,可以增加脂质体趋心肌靶向性 .应用ＳＯＤ以及Ｌ—精氨酸可以治疗心肌缺血 ,但这些药物难以通过质膜 ,而脂质体可将携载的这些药物送入细胞内 .脂质体包裹ＳＯＤ对心肌Ｉ/Ｒ损伤的保护优于单纯的游离ＳＯＤ .脂质体携载Ｌ—精氨酸灌流心脏能明显减轻心脏Ｉ/Ｒ损伤<1 0 ,1 1 > .2 .2 .8 疫苗佐剂 疫苗防治疾病是一种非常有前途的方法 ,但是某些传统的疫苗能引起许多严重的副作用 .1 974年Ａｌｌｉｓｏｎ<1 2 > 首次报道了脂质体具有明显的免疫佐剂的作用 ,从此揭开了脂质体作为免疫增强剂的序幕 .体内外实验证明<1 3> ,空白或载有巨噬细胞激活因子 (ＭＡＦ)或干扰素的脂质体可激活巨噬细胞 ,选择性地溶解感染病毒的细胞而不损伤正常细胞 .Ｆｒａｓｅｒ Ｓｍｉｔｈ等<1 4 > 报道壁壁酰二酞(ＭＤＰ)包裹于脂质体后对小鼠白色念珠菌病疗效提高了 1 5～ 70倍 .脂质体之所以能作为良好的免疫佐剂 ,是由于脂质体能比较容易地集中于主要免疫器官 ,有利于将抗原传递给抗原处理细胞或其它免疫活性细胞 .另外 ,巨噬细胞摄取脂质体后可以破坏其膜结构同时由于补体依赖的脂质体免疫溶解作用产生的抗原释放可形成免疫复合物 ,后者又能使其维持长时间的效价抗体及产生免疫记忆<1 5> .脂质体具有免疫佐剂的功能而无目前所有佐剂的毒副作用<1 6> .3 脂质体药物的制备方法脂质体药物的制备方法很多 ,方法不同 ,所制备脂质体药物的粒径、层次及药物的包封率不同 .目前常用的制备方法可分为 3大类 ,即机械分散法、两相分散法和表面活性剂法 .3.1 机械分散法将类脂及脂溶性药物混合溶于有机溶剂中 ,通入氮气或减压去除有机溶剂 ,在容器底壁上形成类脂薄膜 ,然后将溶有药物的水溶液加入到类脂薄膜上 ,使脂质水化 ,再使类脂膜吸水膨胀、弯曲封闭可以形成脂质药物 .3 1 .1 薄膜分散法将磷脂和胆固醇等类脂及脂溶性药物溶于有机溶剂 ,然后将此溶液置于一大的圆底烧瓶中 ,再将烧瓶与一个旋转蒸发器相连 ,旋转蒸发 ,在真空下蒸除有机溶剂 ,然后将烧瓶浸入 30℃的恒温水浴中 ,旋转使其在器壁形成一层均匀的薄膜 ,再将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲溶液中 ,将此缓冲液加入上述的烧瓶中 ,再加入一些小的玻璃球以帮助分散 ,再次将烧瓶
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