贝母是中医用于治疗虚劳咳嗽、心胸郁结、咯血和急慢性支气管炎的重要药物,其中以川贝(Bulbusfritillaria cirrhosa~·)疗效最佳。
川贝母(Bulbusfritillaria cirrhosa~?)为百合科(Litlaceae!)植物川贝母"厅itillat‘i0 c打rhost~. 1).【)on,暗紫贝母fritillari0 unibratjteata f|siao et K.C.1tsia,甘肃贝母fritillaria Maim.或梭砂贝母fritillaria delava“Franch.的干燥鳞茎。。。川贝母主产于四川甘孜州、阿坝州及与青海、甘肃 、西藏交界的地区∽。,其主要成分为异甾体类生物碱和其他生物碱。目前已有研究,如王化远等 ”0报道从瓦布贝母中分离并鉴定了5种生物碱:
西贝素、贝母辛、鄂贝乙素、异浙贝甲素和西贝 素氮氧化物。本文在继续研究中分离得到一种新的异甾体生物碱——异浙贝甲素氮氧化物(isoverticine—13一Ⅳ一oxid~:)。异浙贝甲素氮氧化物(IⅡ),白色粉末,mp207～210气。电喷雾质谱(Es.MS)显示其(M’+1)峰为448(基峰);EI—M S显示分子离子峰446(M’一1),结合生源和碳谱数据及元素分析确定分子式为c:,H。 ,0。N,其EI—MS碎片裂解规律显示c一去甲一D高甾生物碱的特征。“,所形成的特征碎 片离子98,lll,H2(100%)与浙贝甲素相同,故应具有CeVine类生物碱陈茜等 :异浙贝甲素氮氧化物的分离和结构鉴定的骨架。强峰430(M’一1一16)应为N一0裂分 脱氧形成,证明其可能具有氮氧化物结构。碳谱显示无占80以上信号,表明不存在羰基或双键, 排除为西贝素类骨架的可能;I)Elyr谱显示670～80之间出现两个取代亚甲基信号,从 生源看III不可能为具有两个一c心一0H结构单元的骨架,故推测骨架中具有一cH:一N— CH:.,但正常情况下这两个碳信号应在艿60左右,出现如此大的低场移动现象极可能是N上 有氧取代,这与EI—MS中有关碎片峰的出现相吻合。‘HNMR显示,3a.H(3.59) ,6一H(3.85),而浙贝甲素的这两个H信号分别为3a—H(3.50),6B—H(3 .44)”’,相差甚远;再比较异浙贝甲素(IV)的这两个H信号:3a—H(3.63), 6a—H(3.85)怕0,与III更接近,所以ⅡI的6一H应为Q—H。综合Es—MS, EI—MS,。’cNMR,I_)EVr谱和’ftNMR,推测IⅡ的结构为异浙贝甲素类骨 架氮氧化物。将Iu的碳谱与异浙贝甲素及西贝素氮氧化物的碳谱数据一。进行比较(表1),从 c一1到c一17,III的6值与异浙贝甲素数据均非常接近,可以推定两者的A,B,c,D 的结构和稠合形式是一致的,它们的结构差异仅在C—18和c.26位:由于受到N上氧原:子 去屏蔽效应影响,其6值显著移向低场;从c一18到c.27,III的6值与西贝素氮氧化物 相应数据非常接近(其中c一19例外,其艿值与异浙贝甲素更为接近,因为19位碳其实是位于 A和B环之间的一个角甲基,受C一6羟基的影响大于N—O基团的影响),:圮其是c.18和 c.26由于受到氧原子的影响均向低场移动,而这几个碳刚好组成E和F环骨架。再将西贝素到 西贝素氮氧化物时碳信号6值的变化趋势与异浙贝甲素到异浙贝甲素氮氧化物时碳信号8值的变化趋势相比较,关键部位变化趋势大体一致。综上所述,将ⅡI的结构确定为异浙贝甲素氮氧化物。’Fable1 Comparison of the variation of’。Cchemical shifts Of IⅡt0 IV and II tO I59.812.672.O63.561.417.210.4 O 1 0.3 4,110 6一i.6 R1IIl:Rl=一OHII:RI==O R, I:R2-_=O;lV:R,=一()H实验部分熔点用Electrothermal型熔点测 定仪测定,温度未校正。质谱用vG一7070E型质谱仪测定。核磁共振谱用Br~aker-Ac.E200和ValrianuNl0N 400核磁共振仪测定,溶剂氘代氯仿或氘代甲醇,‘I'MS为内标。薄层色谱用硅胶GR,。和 硅胶H均为青岛海洋化工厂制品(10～40“)。样品采于四川茂县果力依,由四川大学唐心曜教授提供并鉴定。l提取和分离干燥瓦布贝母鳞茎薄片45kg用10%氨水浸润24 h,用cHcl,一Et,0一Et()H(8:25:25)混合溶剂室温浸渍3次,每次7 d,直至浸出液无生物碱反应,合并浸提液,60 qC浓缩,用Hcl调至pH 4～5,过滤;滤液再用Na()H溶液调至pH 9～10,用cHcl,萃取3次,回收CH~:1,得总生物碱。总碱先用Et:0溶解,Et: 0溶解部分回收溶剂后得棕黄色固体A。剩余Et:O不溶物以Me()H溶解,过滤,回收Me ()H得黄棕色固体B。A用硅胶H柱色谱,以cHCl,一Et0Ac一二乙胺(5:5:1) 及Me()H洗脱,洗脱液分别合并浓缩得1,2,3,4,5部分溶液。其中2部分为I(白色雪花状晶体,1.69g);4部分经TLc确定为II(白色无定性粉末,400 mg);5部分与B合并,经柱色谱,以Et:O.Me:c0一二乙胺(8:0.2:1)洗脱, 得I(白色晶体),再以cHcl,一:Et()Ac.
二乙胺(5:5:1)洗脱,得II(白 色无定性粉末);然后以cHCl,Me()H一二乙胺(4:0.2:1)洗脱,得到化合物IH(白色晶体,120mg)。2 结构鉴定化合物I 白色晶体,1.69 g,mp 265～267℃,(268—270℃)随0。分子式为c:。H。,03N。”cNMR(400 MHz,CDCl,)8:37.4(1),30.4(2),70.6(3),30.2(4), 56.3(5),210.8(6),46.8(7),41.9(8),56.5(9),38 .1(10),29.7(11),46.4(12),34.0(13),40.1(14), 26.7(15),18.6(16),38.9(17),59.6(18),12.5(19 ),71.9(20),22.2(21),63.3(22),19.5(23),29.4(24),27 3 6 0 6O 2 2 7 2 57 l 7 6 7 ,体拇加毖撕卯4 ●8 7 9 6, 0 ●2 2 O1 l9 0 ●5 6 4吼b n加位"3 ●9 2 5 83 5 2 3 5 67 ●7 7 7 l堪拇加丝撕卯27.6(25),61.2(26),t7。l(27)。以上碳谱数据与文献。 。“报道一致。与西贝素标准品TLC对照(Et,O.Me2CO.二乙胺8:0.2:1;C HCl3一EtOAc.二乙胺5:5:l;CHCl,一MeOH一二乙胺4:0.2:1),Rf值相同。由以上数据鉴定I为西贝素。化合物II白色无定形粉末,400mg,分子式为C27 H43 04N,’HNMR(400 MHz,CDCl3)6:0.81(3H,S,19一H),1.12(3H,s,2l—H), 3.53(3a—H),1.46(d,27一H)。以上氢谱数据与文献报道旧。一致。与西贝 素氮氧化物标准品TLc对照(CHCl,.EtOAc一二乙胺5:5:1;CHCl3.Me OH.二乙胺4:0.2:1;CHCl,一二乙胺6:1),Rf值相同。由以上数据鉴定Ⅱ为西贝素氮氧化物。化合物IⅡ白色晶体,120mg,mp 207～210 qC。元素分析c:。H4,O。N,各元素的质量分数为实验值(%):C 72.14,H 10.22,N 3.30;理论值(%):C 72.25,H 10.1,N 3.13。MS m/z:446(M’一1),430,112(100%),11 l,98。‘HNMR(200 MHz,CD,OD)6:3.85(6a.H),3。59(3a。H);”CNMR(400 MIqz,CD。OD)8:39.5(1),32.3(2),72.7(3),35.7(4) ,49.5(5),73.4(6),40.3(7),35.7(8),58.9(9),35 .5(10),31.9(11),40.8(12),36.8(13),45.0(14), 25.6(15),21.4(16),49.7(17),73.3(18),15.1(19 ),18.5(20),18.5(21),73.2(22),21.2(23),30。3( 24),26.8(25),75.5(26),16.8(27)。异浙贝甲素氮氧化物的分离和结构鉴定@陈茜$四川大学华西药学院药化教研室!四川成都 610041
@祝丽华$四川大学华西药学院药化教研室!四川 成都 610041
@徐云峰$中美合资昆明滇红药业有限公司!云南 昆明 650106
@范举正$四川大学华西药学院药化教研室!四川 成都 610041川贝母;;异浙贝甲素氮氧化物;;浙贝甲素;;西贝素目的 研究川贝母的化学成分。方法 运用色谱方法进行分离纯化,用氢谱、
碳谱、DEPT谱及质谱鉴定其结构。结果 从四川家种贝母新种——
瓦布贝母(Bulbus fritillaria wabuensis S.Y.Tang et S.C.Yueh)鳞茎中分得3个甾体生物碱,分别为:西贝素(imperialine,Ⅱ) ,西贝素氮氧化物(imperialine-β-N-oxside,Ⅱ),异浙贝甲素氮氧化物(isoverticine-β-N-oxide,Ⅲ)。结论化合物Ⅲ为一种新的异甾体生物碱,命名为异浙贝甲素氮氧化物(isovertlcine-β-N-oxide)